期刊名称:Food Innovation and AdvancesDOI:https://doi.org/10.48130/fia-0025-0006设施栽培是高端葡萄生产的有效措施。然而,长期使用塑料薄膜会对光照环境产生负面影响,导致果实品质出现一定程度的下降。本研究采用六种不同光处理,包括白光(W)、红光(R)、蓝光(B)以及三种不同比例的红蓝光组合(分别为1:1、4:1、1:4),监测“妮娜皇后”葡萄的品质及感官特性。与对照组(无补光)相比,所有光处理均显著增加了果实的大小和重量,提高了果实中糖、花青素、类黄酮和挥发性有机化合物(VOCs)的含量,同时降低了叶绿素和有机酸的水平。此外,红蓝光1:4组合(R1B4)处理提高了矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(Cy)和芍药素3O葡萄糖苷(Pn)的含量,这两种物质是红葡萄果实中的主要花青素成分。另外,酯类化合物占VOCs总量的42%以上,是“妮娜皇后”葡萄的主要挥发性成分,且R1B4处理对VOCs的积累促进效果最佳。红蓝光1:4组合(R1B4)处理下,葡萄果实的综合评分和感官评分最高,对果实着色、糖、花青素、类黄酮及VOCs积累的积极影响最为显著,其次是蓝光处理。综上,本研究结果表明,R1B4光处理是提高“妮娜皇后”葡萄果实品质的有效策略。(1)不同光处理对葡萄果实着色的影响
以自然光照为对照,探究不同光处理对“妮娜皇后”葡萄品质和感官特性的影响。所有处理的葡萄表皮颜色均从绿色逐渐转为红色,但不同光处理对颜色外观的影响显著(图1a)。处理45天时,R1B4处理的葡萄表皮呈现均匀且完全的红色,白光处理的葡萄表皮呈浅红色,而对照组主要保持浅黄色(图1a)。此外,R1B4处理还显著增加了单果重和横径(图1b、d),但对纵径无显著影响(图1c)。
采用a*、b*、c*等色差参数评价果实颜色变化:a*值为正表示红色,为负表示绿色;b*值为正表示黄色,为负表示蓝色;c*值表示颜色饱和度,数值越高,颜色饱和度越高。对照组的a*、b*、c*值均呈上升趋势,表明其表皮颜色从绿色逐渐向红色过渡(图1e-g);所有光处理组也呈现类似趋势,符合葡萄果实自然成熟过程中的表型变化规律。处理45天时,R1B4、R4B1、R1B1和B处理组的a*、b*、c*值显著高于其他处理组(图1e-g),表明与R处理、W处理和对照组相比,这四种处理能更有效地促进“妮娜皇后”葡萄表皮着色,提升红色程度。
图1.不同光质处理下葡萄的表型及生理特性。(a)不同光质处理15天、30天、45天后“妮娜皇后”葡萄的颜色表型。缩写说明:W,白光处理;R,红光处理;B,蓝光处理;R1B1,红蓝光1:1组合处理;R4B1,红蓝光4:1组合处理;R1B4,红蓝光1:4组合处理。(b)-(d)各项生理指标测定,包括单果重、纵径和横径。(e)色差a*值;(f)色差b*值;(g)颜色饱和度c*值。数据以平均值±标准差表示(n=10)。不同字母表示基于单因素方差分析(P<0.05)的统计显著差异。(2)光处理促进葡萄果实糖分积累并降低有机酸含量
总可溶性固形物(TSS)和可滴定酸度(TA)与果实口感及消费者接受度密切相关。所有光处理均显著促进了TSS的积累,降低了TA含量(图2a、b),导致葡萄成熟过程中TSS/TA比值逐渐升高(图2c)。处理45天时,R1B4处理组的TSS/TA比值最高,其次是B处理组,对照组最低(图2c)。
对葡萄糖、果糖和蔗糖三种可溶性糖的含量测定结果显示:无论对照组还是光处理组,葡萄糖含量最高,其次是果糖,蔗糖含量最低(图2d-f)。与对照组相比,处理45天时,R1B4、B和R4B1处理组的葡萄糖含量分别显著增加了50.54%、43.51%和17.20%(图2d);R1B4、B和R1B1处理组的果糖含量分别显著增加了78.22%、45.41%和22.36%(图2e);R1B4、B、R1B1和R4B1处理组的蔗糖含量分别显著增加了134.68%、89.64%、43.24%和46.85%(图2f)。综上,R1B4和B处理能显著提高果实的可溶性糖含量,而W和R处理对可溶性糖含量的影响无统计学意义。
对三种有机酸(酒石酸、苹果酸、柠檬酸)的含量测定结果显示:所有处理组的有机酸含量均逐渐下降,但光处理组的有机酸含量始终低于对照组,其中R1B4和B处理组的降低效果最为显著(图2g-i)。处理45天时,与对照组相比,R1B4处理组的酒石酸、苹果酸和柠檬酸含量分别降低了79.08%、72.05%和65.27%(图2g-i)。综上,葡萄成熟过程中,不同光质处理均能在不同程度上提高可溶性糖含量、降低有机酸含量,其中R1B4和B处理的效果优于R和W处理,更有利于提升葡萄的甜度、降低酸度。
图2.不同光质处理15天、30天、45天后葡萄果实的糖酸变化。(a)总可溶性固形物含量(TSS);(b)可滴定酸度(TA);(c)糖酸比(TSS/TA);(d)葡萄糖含量;(e)果糖含量;(f)蔗糖含量;(g)酒石酸含量;(h)L-苹果酸含量;(i)柠檬酸含量。数据以平均值±标准差表示(n=3)。不同字母表示基于单因素方差分析(p<0.05)的统计显著差异。
葡萄表皮颜色主要由花青素积累和叶绿素降解共同决定。为明确不同光质处理对“妮娜皇后”葡萄花青素组成的影响,本研究测定了总花青素含量(TAC)及五种主要单体花青素(芍药素-3-O-葡萄糖苷(Pn)、矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(Cy)、矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷(Pt)、飞燕草素-3-O-葡萄糖苷(Dp)、锦葵素-3-O-葡萄糖苷(Mv))的含量。与对照组相比,所有光处理在三个实验阶段均显著提高了TAC,其中R1B4和B处理组的提升效果最为显著(图3a),表明光照对花青素积累具有关键作用。
不同光质处理均显著提高了葡萄果实中五种单体花青素(Cy、Pn、Dp、Pt、Mv)的含量(图3b-f)。在所有花青素衍生物中,Pn和Cy的含量显著高于Dp、Pt和Mv:处理45天时,Pn和Cy的总占比在R4B1处理组中为50.6%,在B处理组中高达67.5%。此外,R1B4和B处理提高了Cy的占比,而R4B1处理提高了Mv的占比和含量(图3b-f)。进一步分析发现,大多数花青素组分在R1B4处理组中含量最高,在W处理组中含量最低(图3b-f),表明R1B4光是促进葡萄花青素积累的最佳光质。
为探究光处理对叶绿素降解的影响,本研究测定了葡萄表皮叶绿素浓度的动态变化:葡萄成熟过程中,表皮叶绿素浓度呈逐渐下降趋势。处理45天时,R1B4和B处理组的总叶绿素浓度显著低于其他处理组(图3g);叶绿素a(Chl a)和叶绿素b(Chl b)的变化趋势与总叶绿素一致(图3h,i)。上述结果表明,叶绿素降解对光处理敏感;外源补光(尤其是R1B4处理)可通过促进花青素合成和加速叶绿素降解,推动葡萄果实着色。
图3.不同光质处理15天、30天、45天后葡萄果实的花青素组分及色差变化。(a)总花青素含量(TAC);(b)芍药素-3-O-葡萄糖苷含量(Pn);(c)矢车菊素-3-O-葡萄糖苷含量(Cy);(d)矮牵牛素-3-O-葡萄糖苷含量(Pt);(e)飞燕草素-3-O-葡萄糖苷含量(Dp);(f)锦葵素-3-O-葡萄糖苷含量(Mv);(g)-(i)总叶绿素含量、叶绿素a含量、叶绿素b含量。数据以平均值±标准差表示(n=3)。不同字母表示基于单因素方差分析(P<0.05)的各时间点含量统计显著差异。
(4)不同光处理对类黄酮含量及组成的影响
在“妮娜皇后”葡萄成熟阶段,共鉴定出12种类黄酮,分属4个亚类:黄烷醇类:原花青素B1(PB1)、原花青素B2(PB2)、儿茶素、表儿茶素、表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG);黄酮醇类:槲皮素-半乳糖苷(quercetin-gal)、槲皮素-葡萄糖苷(quercetin-glu)、杨梅素-半乳糖苷(myricetin-gal)、杨梅素-葡萄糖苷(myricetin-glu)、山奈酚-半乳糖苷(kaempferol-gal);异黄酮类:大豆苷元;黄酮类:芹菜素-7-O-葡萄糖苷(Api-7-O-glu)(图4)。
与对照组相比,R1B4处理组的总类黄酮含量最高,其次是R4B1处理组,而R1B1和B处理组的总类黄酮含量增幅最低;此外,W/R处理组与对照组的总类黄酮含量无统计学差异(图4a)。黄烷醇和黄酮醇的变化趋势与总类黄酮一致(图4b,c)。有趣的是,所有光处理组的异黄酮(大豆苷元)含量均呈上升趋势(图4d),而黄酮(芹菜素-7-O-葡萄糖苷)含量则显著下降(图4e)。进一步分析类黄酮各亚类的占比发现:所有处理组中,黄烷醇占总类黄酮的比例均超过50%,其次是黄酮醇(占比超过25%),黄酮占比不足9.0%。综上,R1B4处理组总类黄酮含量较高,主要归因于其黄烷醇和黄酮醇含量显著升高。
图4.不同光质处理45天后葡萄果实的类黄酮组分变化。(a)总类黄酮含量;(b)黄烷醇含量;其中PB1为原花青素B1,PB2为原花青素B2,EGCG为表没食子儿茶素没食子酸酯;(c)黄酮醇含量;其中Quercetin-gal为槲皮素-半乳糖苷,Quercetin-glu为槲皮素-葡萄糖苷,Myricetin-gal为杨梅素-半乳糖苷,Myricetin-glu为杨梅素-葡萄糖苷,Kaempferol-gal为山奈酚-半乳糖苷。(d)异黄酮含量;(e)黄酮含量。数据以平均值±标准差表示(n=3)。不同字母表示基于单因素方差分析(p<0.05)的统计显著差异。
(5)不同光处理对挥发性有机化合物(VOCs)的影响
VOCs是决定葡萄果实香气特性的主要物质。为探究不同光处理对“妮娜皇后”葡萄香气特性的影响,本研究在处理45天时采用GC-MS对VOCs进行定性和定量分析。变异系数(CV)分析显示,质控(QC)样品中CV<0.3的VOCs占比超过85%,表明实验结果可靠。主成分分析(PCA)显示,所有样品基于3次生物学重复可良好聚类;前五个主成分的累积方差贡献率达81.70%,分别为31.14%、19.88%、13.54%、10.60%和6.54%;此外,基于离子峰的QC样品PC1值均在±3个标准差范围内,进一步验证了分析结果的可重复性。
本研究共鉴定出107种VOCs,分为11类,包括32种酯类、24种萜类、10种芳香族化合物、9种杂环化合物、8种酮类、8种酸类、7种醛类、4种醇类、2种酚类、2种烃类和1种胺类(图5a,b)。其中,酯类、杂环化合物、萜类和酸类的相对含量在所有样品中位居前四(图5a);酯类不仅种类最多,且含量最高,占总VOCs的42%以上(图5a),表明酯类是“妮娜皇后”葡萄的主要挥发性成分。
与对照组相比,R1B4、B、R4B1、R、R1B1和W处理组分别有89种、80种、72种、40种、25种和2种差异代谢物上调(图5d)。不同光质补光均显著增加了VOCs的总释放量,其中R1B4处理组的增加效果最为显著(图5a),表明光照参与调控VOCs的积累。此外,除W处理外,其他光处理组均共上调10种差异代谢物,包括4种酯类(香叶基异丁酸酯、丁酸、己酸、癸酸)、1种萜类(顺式-β-法尼烯)、1种杂环化合物(1-戊酮-1-(1H-咪唑-4-基))、1种醇类(正十三醇)、1种醛类(2,6-十二碳二烯-1-醛)、1种酮类((E)-2-丁烯-1-酮-1-(2,6,6-三甲基-2-环己烯-1-基))和1种酸类(2,3-二羟基苯甲酸)(图5c),表明这些VOCs可能是“妮娜皇后”葡萄的关键香气物质。
进一步计算各差异代谢物占总VOCs的比例发现,几乎所有光处理组中均有20种差异代谢物的占比>1%,包括6种酯类、5种杂环化合物、2种酸类、2种萜类、2种醇类、2种芳香族化合物和1种醛类。其中,2,4-癸二烯酸(酯类)的占比在各处理组中均超过24%,其次是吡咯并[3,2-d]嘧啶-2,4(1H,3H)-二酮(杂环化合物,占比超过14%)和(2E)-2-(乙酰肼基)丙酸(酸类,占比超过5%),表明这些代谢物可能是构成“妮娜皇后”葡萄香气感官特性的主要成分。综上,R1B4处理最有利于“妮娜皇后”葡萄VOCs的积累。
图5.不同光质处理45天后葡萄果实的香气组分变化。(a)总香气含量;(b)韦恩图展示六种光处理与对照组相比的特有及共有香气代谢物;(c)六种光处理与对照组相比上调和下调的香气组分;(d)所有处理中107种挥发性有机化合物(VOCs)组分的热图。
(6)葡萄果实品质指标的相关性分析
对“妮娜皇后”葡萄19项品质指标的相关性分析表明,各项指标对葡萄品质的反映程度不同,且指标间存在一定的相关性。采用Pearson相关系数分析19项指标的相关性(图6a),结果显示:可滴定酸度(TA)、酒石酸(TTA)、苹果酸(LMA)和柠檬酸(CA)与其他指标呈显著负相关,而四种有机酸之间呈显著正相关;总可溶性固形物(TSS)、葡萄糖、果糖和蔗糖与花青素及挥发性物质相关指标呈显著正相关;此外,锦葵素-3-O-葡萄糖苷(Mv)与其他指标的相关性较低(图6a)。
对糖组分、有机酸、花青素及主要挥发性物质等19项指标进行主成分分析(PCA)(图6b),结果显示:前两个主成分的累积方差贡献率达92.67%,基本可反映所有数据信息,因此将19项品质指标简化为两个主成分,用于综合品质评价。其中,第一主成分(PC1)的特征值为15.86,方差贡献率为83.5%,在分析中起关键作用;总花青素含量(TAC)、酯类、萜类和杂环化合物(HC)的载荷值较高,且均对PC1呈正向贡献,反映了“妮娜皇后”葡萄的花青素水平和香气水平;B、R4B1和R1B1处理组在PC1轴上呈正向分布,表明这些光处理可提升葡萄的花青素和香气水平。第二主成分(PC2)的特征值为1.75,方差贡献率为9.2%;飞燕草素-3-O-葡萄糖苷(Dp)和锦葵素-3-O-葡萄糖苷(Mv)的载荷值较高,表明PC2主要反映特定花青素的水平;W、R和R4B1处理组在PC2轴上呈正向分布,表明这些处理比其他处理更能提高Dp和Mv的含量。
为区分不同光处理对“妮娜皇后”葡萄口感的影响,本研究进行了盲测实验:由经过训练的感官评定小组对不同光处理的葡萄进行评分,结果以雷达图表示(图6c)。R1B4处理组的葡萄在甜度、香气强度和颜色深度方面的评分高于其他处理组;B处理组的葡萄在口感平衡度方面的评分显著高于其他光处理组;对照组的葡萄酸度评分高于所有光处理组(图6c)。综上,所有光处理组的感官评分均高于对照组,其中R1B4处理组的感官评分最高,其次是B处理组。
图6.“妮娜皇后”葡萄19项品质指标的相关性分析。(a)颜色深度和圆圈大小与各相关系数值成正比,红色表示正相关,蓝色表示负相关。其中TTA为酒石酸,LMA为L-苹果酸,CA为柠檬酸,Ant为总花青素,HC为杂环化合物。(b)不同处理下“妮娜皇后”葡萄成熟阶段生理指标的主成分分析(PCA)得分图。(c)不同处理葡萄采收期的感官评定雷达图。
3.结论
本研究探究了不同光质对设施栽培“妮娜皇后”葡萄果实品质的影响,结果表明:所有光处理均对葡萄品质具有积极作用;在六种光处理中,红蓝光1:4组合(R1B4)效果最佳,显著提高了葡萄果实中糖、花青素、类黄酮的含量及香气成分中酯类和萜类的比例,同时降低了叶绿素和有机酸的水平;主成分分析(PCA)和感官分析显示,R1B4处理组葡萄的综合评分和感官评分最高。综上,在设施栽培条件下,采用红蓝光1:4组合补光可最有效地提升“妮娜皇后”葡萄的品质。